凈化   

吸取約3.0 mL上述離心上清液，過PRIMEHLB(P/N:186008057)固相萃取柱，收集續(xù)濾液后，過0.2 μmGHP濾膜(WAT097962)，裝入2 mL樣品瓶(溶液澄清)，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定用。

   色譜條件   

儀器系統(tǒng)：ACQUITY UPLC®I-Class system

色譜柱：Torus DEA Column, 130? 1.7 μm, 2.1×100mm(P/N:186007616)

流動(dòng)相A：乙腈                 

流動(dòng)相B：20 mM 甲酸銨緩沖液(pH=3.0)

流   速：0.45 mL/min         

柱   溫：35?C          

進(jìn)樣量:  1 μL。

   質(zhì)譜條件   

質(zhì)譜系統(tǒng)：Xevo TQ-S Micro 質(zhì)譜儀

電離模式：ESI-

電離電壓：0.75 KV      

脫溶劑氣：流量1000 L/hour     

溫度：500 ?C

MRM 檢測參數(shù)見下表：

表中: 

ClO3- 定量離子對為: 82.9681>66.9031      

ClO4- 定量離子對為: 98.9681>82.9183

ClO3-和ClO4-出峰正常，如下圖：

ClO3-在0.5-50ng/mL濃度之間，相關(guān)系數(shù)R2>0.997。

ClO4-在0.5-50ng/mL濃度之間,相關(guān)系數(shù)R2>0.999。

本方法在空白樣品中加標(biāo)75、150 μg/kg添加濃度時(shí)，回收率在80%～110%之間。

   凈化效果比較   

將提取液中的甲醇換成乙腈后，再過PRIME HLB小柱，經(jīng)此改進(jìn)，樣品溶液放置幾天仍保持澄清，未出現(xiàn)沉淀物，如下圖：

   重現(xiàn)性   

樣本連續(xù)6針進(jìn)樣重現(xiàn)性結(jié)果如下圖所示，

含量重現(xiàn)性ClO3-:RSD為5.8%，ClO4-:RSD為2.1%;

RT重現(xiàn)性:ClO3-:和ClO4-RSD均<0.1%,

未出現(xiàn)保留時(shí)間漂移的現(xiàn)象。

如下圖：

   討論   

PRIME HLB小柱

(PN:186008057,6cc/200mg) 

具有很好的去磷脂，脂肪的作用，過柱后的供試品溶液減少了污染色譜柱的風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)也大大降低基質(zhì)效應(yīng)。

Torus DEA色譜柱

作為HILIC機(jī)理色譜柱使用,須按Hilic柱的方法測柱效,而且須用50 mM以上濃度的緩沖鹽作為水相流動(dòng)相測試,用后保存在95:5(V:V)=乙腈:水中。

此色譜柱原為UPC2色譜柱，故初次用作高氯酸鹽，氯酸鹽測試時(shí)，應(yīng)使用適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相將其轉(zhuǎn)換為HILIC模式。