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進(jìn)樣體積與色譜柱的柱體積直接相關(guān),因此取決于色譜柱的橫截面積 (A=π r2) 和長(zhǎng)度 (L)。
因此,您可以根據(jù)現(xiàn)有的進(jìn)樣量方法估計(jì)任何調(diào)整。 如果您要轉(zhuǎn)換為不同的內(nèi)徑( 具有相同的包裝材料和長(zhǎng)度 ),只需將當(dāng)前體積乘以半徑平方的比率即可確定新方法的正確體積。 進(jìn)樣量和zui佳流速受色譜柱內(nèi)徑的限制。 理想情況下,對(duì)于不同的柱長(zhǎng),您的樣本量應(yīng)該是:
色柱內(nèi)徑 | 體積 (μL) |
---|---|
2.1 mm(30 -100 mm) | 1-3< |
3.0-3.2 mm(50-150 mm) | 2-12 |
4.6 mm(50-250 mm) | 8-40 |
10 mm(50-250 mm) | 40-100 |
21.2 mm(50-250 mm) | 150-300 |
30 mm(50-250 mm) | 300-700 |
50 mm(50-250 mm) | 1000-2000 |
如果峰仍然對(duì)稱,則可以接受更大的體積。如果體積過(guò)大,較早的洗脫峰將首先展寬。
如果樣品中的溶劑比流動(dòng)相強(qiáng)(如果使用梯度則為起始比率 ),則需要使用較小的體積。
同樣,如果您的樣品溶劑比流動(dòng)相弱,您可以使用更大的體積。
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